【中西合璧】电针通过调节 CaMKII 减轻 CFA 诱导的炎症性疼痛

11171637193656140

上海中医药大学隶属龙华医院麻醉科

82431637193656584

 

91451637193656644

1. 先容

炎症性疼痛是临床上难以治疗的常见病症。 它涉及细胞免疫和非细胞免疫。 另外,其临床特性包罗疼痛阈值低落、疼痛回响加强和自发性疼痛。必要确定副浸染最小的有用治疗要领。按照中医理论,人体稀有百个穴位;穴位,尤其是足三里和三阴交穴,可刺激止痛。天下卫生组织曾报道针灸可治疗77种疾病。另外,电针 (EA) 普及应用于临床实践。

前扣带回皮层 (ACC) 参加高级皮层成果,包罗危险感觉、慢性疼痛、认知和情感。ACC 被各类有害刺激激活。另外,它参加认知进程并在疼痛调理中施展要害浸染,出格是内源性镇痛体系。 在福尔马林诱导的炎症性疼痛大鼠模子中,电针对足三里和三阴穴具有镇痛浸染;这种通过对侧电针得到的结果在 ACC 损伤后消散。Ca2+/钙调卵白依靠性卵白激酶 II (CaMKII) 是一种多成果丝氨酸/苏氨酸激酶,凡是由 12 个亚基构成,每个亚基由四种基因(α、β、γ 和 δ)之一编码 。CaMKII 是至关重要的参加突触可塑性和长时程加强 (LTP) 。已表现克制脊髓 CaMKII 表达可防备热痛觉过敏和机器性非常性疼痛。α-氨基-3-羟基-5-甲基-4-异恶唑丙酸 (AMPA) 受体介导大脑中的大量欢快性转达。AMPA 受体是异源多聚体,由几个亚基组装而成,包罗 GluA1、GluA2、GluA3 和 GluA4;详细而言,在前脑中,它首要由 GluA1 和 GluA2 构成。值得留意的是,GluA1 亚基在急性、慢性或一连性炎症回响中起着至关重要的浸染。含有 GluA1 和 GluA2 的 AMPA 受体别离具有高和低的 Ca2+ 渗出性。早年的研究表白,GluA1 和 CaMKII 在 LTP 进程和可塑性变革中起要害浸染;与 LTP 相同,危险性刺激会诱导脊髓和脊髓上布局中的神经元敏作用。 另外,PICK1是一种含有 PDZ 和 BAR 布局域的卵白质,先前的研究表白,CaMKII 的催化布局域与异源细胞和神经元中的 PICK1 BAR 布局域共定位。然而,今朝尚不清晰 CaMKII-GluA1 通路和 C-P 复合物是否参加 ACC 的炎症性疼痛调理。并且该通路的电调理尚未成立。另外,EA 参加该途径的机制仍不清晰。

在这项研究中,我们行使了由完全弗氏佐剂 (CFA) 诱导的炎症性疼痛的小鼠模子。我们假设 CaMKII-GluA1 通路参加了 ACC 中炎症引起的疼痛进程。另外,我们假设EA 镇痛机制也许与 ACC 中的 CaMKII 通路有关。

2. 要领

2.1. 动物。 在本研究中,我们从北京维塔尔河尝试动物技能有限公司得到了雄性 C57BL/6 小鼠(年数范畴:6-8 周龄;体重范畴:18-20 g)。(中国北京)。在温州医科大学尝试动物中心将小鼠圈养在受控温度前提 (22°C) 和 12 小年华/暗轮回下,可随意进食和饮水。每组动物数目为尝试组4只(n=4),举动测试每组7只(n=7)。小鼠被随机分组。 我们在 10 : 00 h 和 14: 00 h 之间的光轮回时代举办了全部举动测试。尝试方案经温州医科大学(中国浙江温州)机构动物照顾护士和行使委员会核准。

2.2.炎症疼痛模子和电针模仿。完全弗氏佐剂(CFA,25 μl,Sigma-Aldrich)用于模仿炎性疼痛;作为比较,假手术组小鼠接管皮下打针 PBS(25 μl,pH = 7:4)。

如前所述举办 EA 刺激。在电针刺激时代,小鼠用 1% 的七氟醚麻醉。小鼠深度麻醉后,将针刺部位的皮肤剃毛,并对皮肤举办消毒。电针刺激:电针组小鼠每 2 天接管 30 分钟的电针(2-15 Hz 交变波,1.0 mA),一连 1 周(7 天),行使针灸针(中国云龙), 合用于右后腿足三里(ST36)和三阴交(SP6)。假电针 (SEA) 是将针刺入 ST36 和 SP6 点,无需电流刺激或手动针刺。

2.3. 举动测试。CFA 建模后 2 小时开始 EA 刺激(第 1 天),并在 EA 刺激后 2-3 小时举办举动测试。如前所述举办举动测试。用 von Frey 单丝(0.16 g;North Coast Medical, Inc., Gilroy, CA, USA)丈量对机器刺激的缩爪回响。全部小鼠都在非凡的有机玻璃隔间中安排 1 小时。一组 von Frey 纤维用于评估机器迅速度 (0.008、0.02、0.04、0.07、0.16、0.4、0.6、1、1.4、2 和 4) 并调查小鼠的戒断回响。阳性回响被以为是脚趾舒展、爪子快速缩回和舔爪子。 该尝试表白,0.16 g 刺激最靠近 50% 缩爪阈值。我们行使百分比来评估疼痛强度:缩爪次数/10 次试验。热痛觉过敏用 336 型镇痛仪(IITC, Inc., Life Science Instruments, Woodland Hills, CA, USA)测定。小鼠在有机玻璃隔间中顺应 1 小时。当小鼠宁静时,加热光源指向后爪足底面;小鼠收回脚爪所用的时刻为小鼠收回暗藏期。 每只爪子以 5 分钟的隔断一再丈量五次,然后取均匀值并举办说明。

Copyright © 2020 亚虎官网生物肥料有限公司 All rights reserved   xml地图